Fluorescencia In Situ Hibridación
A hibridación fluorescente in situ (FISH) é unha das varias técnicas utilizadas para buscar o ADN das células, buscando a presenza ou ausencia de xenes específicos ou porcións de xenes.
Moitos tipos diferentes de cancro están asociados a anomalías xenéticas coñecidas. E por xenética, non estamos falando simplemente da herdanza. Ao longo da vida, as células poden cometer erros cando se dividen e crecen.
As mutacións no ADN asociadas ao cancro poden acumularse nestas células.
Como funciona FISH?
FISH é unha técnica que usa sondas fluorescentes para detectar xenes específicos ou partes de xenes (secuencias de ADN). O persoal de laboratorio do centro médico e os oncólogos usan FISH para axudar a avaliar os pacientes que poidan ter cancro e ás veces controlar un paciente que xa foi diagnosticado de cancro e tratado.
O FISH pódese facer utilizando varios tipos de mostras de acordo coa situación e co tipo de cancro que se sospeita: células tumorales obtidas a partir de sangue periférico, a partir dunha biopsia de medula ósea ou dunha biopsia de ganglio linfático e formalina para o tecido embebido de parafina fixo (isto refírese unha mostra de tecido que se procesa no laboratorio e incrustada nun tipo de cera, facéndoa máis ríxida, para que poida ser cortada en seccións finas e montada para a súa visualización baixo o microscopio).
Que significan as cartas?
A "H" en FISH refírese á hibridación.
Na hibridación molecular, úsase unha sonda marcada de ADN ou ARN como sonda: visualice un ladrillo Lego vermello, se o desexa. A sonda utilízase para atopar un ladrillo Lego de contrapartida, ou secuencia de ADN, nunha mostra biolóxica.
O ADN no seu espécime é como pilas de ladrillos Lego e a maioría dos ladrillos destes pilotes non coinciden coa nosa sonda vermella.
E todos os seus ladrillos están ordenadamente organizados en 23 pares de pilotes de ladrillo: cada pila é un dos seus cromosomas homólogos pareados, máis ou menos. A diferenza dos ladrillos Lego, a nosa sonda Lego vermella é como un imán forte e atopa o seu xogo sen ter que ordenar as pilas.
A "F" refírese á fluorescencia. A nosa sonda vermella pode perderse nas pilas de ladrillos, polo que está marcado con tinte fluorescente coloreado para que resplandezca. Cando atopa a súa coincidencia entre as 23 pilas emparejadas, unha etiqueta fluorescente revela a súa localización. Entón, agora pode ver como os investigadores e os clínicos poden usar FISH para axudar a identificar onde (que pila ou cal cromosoma) localiza un determinado xene para un determinado individuo.
O "I" eo "S" están inactivos . Isto refírese ao feito de que o noso ladrillo Lego vermello está a buscar a súa coincidencia dentro da mostra que deu .
Cales son os canceros de sangue específicos?
O FISH e outros procedementos de hibridación in situ úsanse para diagnosticar unha variedade de anomalías cromosómicas: cambios no material xenético, cambios nos cromosomas, incluíndo os seguintes:
Borrado : unha parte dun cromosoma xa non está
Translocación : parte dun cromosoma rompe e se adhire a outro cromosoma
Inversión : parte dun cromosoma rompe e volve a inserir, pero en orde inversa
Duplicación : parte dun cromosoma está presente en demasiadas copias dentro da cela
Cada tipo de cancro pode ter un conxunto propio de cambios cromosómicos e sondas relevantes. FISH non só axuda a identificar os cambios xenéticos iniciais nun proceso de enfermidade como o cancro, pero tamén se pode usar para controlar a resposta á terapia ea remisión da enfermidade.
Os cambios xenéticos detectados por FISH ás veces ofrecen información adicional sobre como se pode comportar o cancro dun individuo, segundo o que se observou no pasado en persoas con cancro similar e cambios xenéticos similares. Ás veces FISH úsase despois de que o diagnóstico xa se realizou, para obter información adicional que podería axudar a predicir o resultado dun paciente ou o mellor tratamento.
FISH pode identificar anomalías cromosómicas nas leucemias , incluíndo a leucemia linfocítica crónica (CLL). Para leucemia linfocítica crónica / linfoma linfocítico pequeno, FISH permite que os pacientes descubran a súa categoría pronóstica: boa, intermedia ou pobre. Na leucemia linfoblástica aguda (ALL), a xenética das células leucémicas pode dicirlle sobre o nivel de risco de cancro e axudar a orientar as decisións terapéuticas.
Os paneis FISH tamén están dispoñibles para linfoma, mieloma múltiple, trastornos proliferativos de células plasmáticas e síndrome mielodisplásico. No caso do linfoma de células do manto, por exemplo, hai unha translocación que FISH pode detectar chamado GH / CCND1 t (11; 14) que frecuentemente se asocia con este linfoma.
Por que FISH?
Unha vantaxe de FISH é que non ten que realizarse nas celas que están dividindo activamente. As probas citogenéticas xeralmente levan preto de tres semanas, porque as células cancerosas deben medrar en pratos de laboratorio durante aproximadamente dúas semanas antes de que poidan ser probadas. En cambio, os resultados de FISH adoitan estar dispoñibles no laboratorio nuns poucos días.
> Fontes:
> Codificación CPT de probas citogenéticas de cancro.
> Fluorescencia In Situ Hibridación (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Fluorescencia In Situ Hibridación (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, e outros. Orientación para a proba de fluorescencia en situ híbrida nos trastornos hematolóxicos. Diario de Diagnóstico Molecular: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.