Propósito e pasos involucrados nunha proba de cariotipo
Se o médico recomendou unha proba de cariotipo para vostede ou o seu fillo, ou despois dunha amniocentesis, o que isto supón? Que condicións pode diagnosticar un cariotipo, cales son os pasos implicados na realización das probas e cales son as súas limitacións?
¿Que é unha proba de cariotipo?
Un cariotipo é unha fotografía dos cromosomas nunha cela . Os cariotipos poden tomarse a partir de células do sangue, células da pel fetal (de líquido amniótico ou placenta) ou células da medula ósea.
Que condicións poden ser diagnosticadas cunha proba de cariotipo?
Os cariotipos pódense usar para detectar e confirmar anomalías cromosómicas como a síndrome de Down e hai varios tipos de anomalías que poden detectarse.
Unha delas é trisomias nas que hai tres copias dun dos cromosomas en vez de dúas. En contraste, as monosomas prodúcense cando só hai unha copia (no canto de dúas). Ademais das trisomias e das monosomias, hai delecións cromosómicas nas que falta un cromosoma e translocacións cromosómicas, onde unha parte dun cromosoma está unida a outro cromosoma (e viceversa en translocaciones equilibradas).
Exemplos de trisomias inclúen:
- Síndrome de Down (trisomía 21)
- Síndrome de Edward ( trisomía 18 )
- Síndrome de Patau (trisomía 13)
- Síndrome de Klinefelter (XXY e outras variacións): a síndrome de Klinefelter aparece en 1 de cada 500 machos recentemente nados e parece estar aumentando a incidencia.
- Síndrome de Triple X (XXX)
Un exemplo de monosomía inclúe:
- Síndrome de Turner (X0) ou monosomía X: aproximadamente o 15% dos abortos espontáneos son debidos ao síndrome de Turner, pero esta trisomía está presente en só un 1 de cada 2000 nacementos vivos
Exemplos de eliminación cromosómica inclúen:
- Síndrome de Cri-du-Chat (falta o cromosoma 5)
- Síndrome de Williams (cromosoma 7 ausente)
Translocations - Existen moitos exemplos de translocations incluíndo a translocation Down syndrome. As translocaciones de Robertsonian son bastante comúns, que se producen en aproximadamente 1 de cada 1000 persoas.
O mosaicismo é unha condición na que algunhas células do corpo teñen unha anormalidade cromosómica mentres que outras non. Por exemplo, síndrome de mosaico Down ou trisomía de mosaico 9. A trisomía completa 9 non é compatible coa vida, pero a trisomía do mosaico 9 pode producir un nacemento vivo.
(Un exemplo vale máis que mil palabras. Aprende sobre as diferenzas entre translocación, trisomía e síndrome de mosaico Down .)
Cando se fai un cariotipo?
Hai moitas situacións nas que un cariotipo pode ser recomendado polo seu médico. Estes poden incluír:
- Infantes ou nenos que teñen condicións médicas que suxiren unha anomalía cromosómica que aínda non foi diagnosticada.
- Os adultos que presentan síntomas que suxiren unha anomalía cromosómica (por exemplo, os homes con enfermidade de Klinefelter poden non ser diagnosticados ata a puberdade ou a idade adulta). Algúns trastornos de trisomía do mosaico tamén poden verse sen diagnosticar.
- Infertilidade: pódese facer un cariotipo xenético para a infertilidade. Como se observou anteriormente, algunhas anormalidades cromosómicas poden ir sen diagnosticar ata a idade adulta. Unha muller con síndrome de Turner ou un home cunha das variantes de Klinefelter poden non ter coñecemento da condición ata que estean lidando coa infertilidade.
- Ensaios prenatales - Nalgúns casos, como a síndrome de Down translocación, a enfermidade pode ser hereditaria e os pais poden ser probados se un neno nace cunha síndrome de Down. (É importante notar que a maior parte do tempo a síndrome de Down non é un trastorno hereditario, senón unha mutación posíbel).
- Deadbirth - Un cariotipo adoita ser feito como parte das probas despois dun mortinato.
- Abortos espontaneos recorrentes: un cariotipo parental de abortos recorrentes pode dar pistas sobre os motivos deses devastadores perdas recorrentes. Pénsase que as anomalías cromosómicas, como a trisomía 16, son a causa de polo menos o 50 por cento dos abortos.
- Leucemia. As probas de cariotipos tamén se poden facer para axudar a diagnosticar leucemias, por exemplo, buscando o cromosoma de Filadelfia que se atopa nalgunhas persoas con leucemia mielóxica crónica ou leucemia linfocítica aguda.
Pasos implicados nunha proba de cariotipo
Unha proba de cariotipo pode soar como unha proba de sangue simple, o que fai que moitas persoas se pregunten por que leva tanto tempo obter os resultados. Esta proba é bastante complexa despois da recollida. Vexamos estes pasos para que poidas entender o que está a suceder durante o tempo que esperas a proba.
1. Colección de mostras
O primeiro paso para realizar un cariotipo é recoller unha mostra. Nos recién nacidos, recóllese unha mostra de sangue que contén glóbulos vermellos, glóbulos brancos, soro e outros fluídos. Un cariotipo farase nos glóbulos brancos que están dividindo activamente (un estado coñecido como mitosis). Durante o embarazo, a mostra pode ser un líquido amniótico recollido durante unha amniocentesis ou unha peza da placenta recollida durante unha proba de mostraxe villi coriónica (CVS). O líquido amniótico contén células da pel fetal que se usan para xerar un cariotipo.
2. Transporte ao laboratorio
Os cariotipos realízanse nun laboratorio específico chamado laboratorio de citogenética, un laboratorio que estuda os cromosomas. Non todos os hospitais teñen laboratorios de citogenética. Se o seu hospital ou centro médico non ten o seu propio laboratorio de citogenética, a mostra de proba enviarase a un laboratorio especializado en análises de cariotipos. A mostra de proba é analizada por tecnólogos citogenéticos adestrados especialmente, Ph.D. citoxenéticos ou xenetistas médicos.
3. Separar as celas
Para analizar cromosomas, a mostra debe conter células que están dividindo activamente. No sangue, os glóbulos brancos dividen activamente. A maioría das células do feto tamén dividen activamente. Unha vez que a mostra chega ao laboratorio de citogenética, as células non divididas están separadas das celas divisorias usando produtos químicos especiais.
4. Células en crecemento
Para ter as células suficientes para analizar, as células divisorias son cultivadas en medios especiais ou nunha cultura celular. Este medio contén produtos químicos e hormonas que permiten dividir e multiplicar as células. Este proceso de cultivo pode levar entre tres e catro días para as células do sangue e ata unha semana para as células do feto.
5. Sincronizar celas
Os cromosomas son unha secuencia longa de ADN humano. Para ver cromosomas baixo un microscopio, os cromosomas deben estar na súa forma máis compacta nunha fase de división celular (mitosis) coñecida como metafase. Para obter todas as células a esta etapa específica da división celular, as células son tratadas cun químico que detén a división celular no punto onde os cromosomas son os máis compactos.
6. Liberación dos cromosomas das súas células
Para ver estes cromosomas compactos baixo un microscopio, os cromosomas deben estar fóra dos glóbulos brancos. Isto faise tratando os glóbulos brancos cunha solución especial que fai que estouran. Isto faise cando as celas están nunha diapositiva microscópica. Os restos sobrantes dos glóbulos brancos son eliminados, deixando os cromosomas pegados á diapositiva.
7. Manchar os cromosomas
Os cromosomas son naturalmente incoloros. Para contar un cromosoma doutro, aplícase un tinte especial chamado tinte Giemsa á diapositiva. As tinturas de Giemsa manchan rexións de cromosomas que son ricas nas bases adenina (A) e timina (T). Cando están manchados, os cromosomas parecen cordas con bandas claras e escuras. Cada cromosoma ten un patrón específico de bandas claras e escuras que permiten ao citogenetista dicir un cromosoma doutro. Cada banda escura ou lixeira engloba centos de xenes diferentes.
8. Análise
Unha vez que os cromosomas están tinguidos, a diapositiva sométese ao microscopio para a súa análise. A continuación, tómase unha foto dos cromosomas. Ao final da análise, determinarase o número total de cromosomas e os cromosomas ordenados por tamaño.
9. Contar cromosomas
O primeiro paso da análise é contar os cromosomas. A maioría dos humanos teñen 46 cromosomas. As persoas con síndrome de Down teñen 47 cromosomas. Tamén é posible que a xente teña cromosomas perdidos, máis dun cromosoma extra ou unha parte dun cromosoma que faltan ou se duplican. Ao mirar só o número de cromosomas, é posible diagnosticar diferentes condicións, incluíndo a síndrome de Down.
10. Clasificación dos cromosomas
Despois de determinar o número de cromosomas, o citogeneticista comezará a clasificar os cromosomas. Para ordenar os cromosomas, un citogenetista comparará a lonxitude do cromosoma, a colocación dos centromeres (as áreas onde se unen as dúas cromátidas) ea localización e tamaño das bandas G. Os pares de cromosomas están numerados desde o máis grande (número 1) ata o máis pequeno (número 22). Hai 22 pares de cromosomas chamados autosomas que se combinan exactamente. Hai tamén os cromosomas sexuais, as femias teñen dous cromosomas X mentres os machos teñen unha X e unha Y.
11. Mirar a estrutura
Ademais de mirar o número total de cromosomas e os cromosomas sexuais, o citogenetista tamén verá a estrutura dos cromosomas específicos para asegurarse de que non faltan materiais adicionais nin anomalías estruturais como as translocacións. Unha translocación ocorre cando unha parte dun cromosoma está conectada a outro cromosoma. Nalgúns casos, dous fragmentos de cromosomas intercambianse (unha translocación equilibrada) e noutras veces engádese ou falla unha peza extra dun só cromosoma.
12. O resultado final
Ao final, o cariotipo final mostra o número total de cromosomas, o sexo e calquera anomalía estrutural con cromosomas individuais. Unha imaxe dixital dos cromosomas xérase con todos os cromosomas ordenados por número.
Límites de probas de cariotipos
É importante notar que, aínda que as probas de cariotipos poden proporcionar moita información sobre cromosomas, esta proba non pode indicar se existen mutacións xenéticas específicas, como as que producen fibrosis quística . O seu conselleiro xenético pode axudarche a entender o que as probas de cariotipos poden dicirlle e que non poden. É necesario máis estudos para avaliar o posible papel das mutacións xenéticas nas enfermidades ou os abortos involuntarios.
Tamén é importante notar que ás veces a proba de cariotipos pode non ser capaz de detectar algunhas anomalías cromosómicas, como cando o mosaico placentario está presente.
O futuro
Na época actual, as probas de cariotipos na configuración prenatal son bastante invasivas, que requiren amniocentesis ou mostras de vellosidades coriónicas. Existen estudos que avalían o ADN libre de células na mostra de sangue dunha nai como unha alternativa moito menos invasiva para o diagnóstico prenatal de anormalidades xenéticas nun feto.
Liña inferior á espera dos resultados do cariotipo
Mentres espera os resultados do cariotipo, pode que se sinta moi ansioso e que a semana ou dúas que tarde para obter resultados pode parecer eón. Leve ese tempo para dedicarse aos teus amigos e familiares. A aprendizaxe sobre algunhas das condicións asociadas a cromosomas anormais tamén pode ser útil. Aínda que moitas das condicións diagnosticadas cun cariotipo poden ser devastadores, hai moitas persoas que viven con estas condicións que teñen unha excelente calidade de vida.
> Fontes
- > Kumar, Vinay, Abul K. Abbas e Jon C. Aster. Robbins e Cotran Base Patolóxica da Enfermidade. Filadelfia: Elsevier-Saunders, 2015. Impresión.
- > Norton, M., e B. Rink. Cambiando as indicacións para probas invasivas nunha era de selección mellorada. Seminarios en Perinatoloxía . 2016. 40 (1): 56-66.
- > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J. e R. Lathi. Comparación de citoxenéticos e cariotipos moleculares para probas cromosómicas de mostras de aborto. Fertilidade e esterilidade . 2017. 107 (4): 1028-1033.